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大肠杆菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌的快速检测。大肠杆菌显蓝绿色,大肠菌群显无色,其它菌显黄色或无色,革兰氏阳性菌被抑制。
成份(g/L)
特殊营养物质 | 37.9 |
显色剂 | 0.2 |
琼脂 | 12.0 |
pH 6.8±0.2 25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得Z佳的结果。
用法
称取本品 50.1g 加入 1000ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。分装三角瓶,121℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心,倾入冷却至 45-50℃ 培养基约 15ml,混匀,凝固后,36℃ 倒置培养 18~24h 。或冷却至 45-50℃ 时,倾入无菌平皿,琼脂*凝固后,在 37℃ 的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml,涂布于培养基上,36℃ 培养18~24h。
操作步骤
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液 1ml 加入冷却至 45-50℃ 显色培养基中混匀或涂布于平板上;
3、36℃ 培养18~24h,选用有 30~200 个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。
总大肠杆菌=蓝绿色菌落;
4、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36℃ 培养 12-16 小时,挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装 4种x4套)。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2、微生物试验
在 36℃ 培养 18~24h 小时:
质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 |
单增李氏菌 | 19114 | -/+ | 无色 |
金黄色葡萄球菌 | 25923 | -/+ | 无色 |
大肠杆菌 | 25922 | +++ | 蓝色 |
沙门氏菌 | 14028 | +++ | 无色 |
产气肠杆菌 | 23355 | +++ | 无色 |
方法的局限性
本培养基鉴定大肠杆菌,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
大肠杆菌典型菌落为蓝绿色,大肠菌群为无色菌落,其它细菌为无色或黄色菌落。
大肠杆菌显色培养基 大肠杆菌ATCC25922 | 大肠杆菌显色培养基 产气肠杆菌ATCC35029 |
大肠杆菌显色培养基 沙门氏菌ATCC14028 | 大肠杆菌显色培养基 阴沟肠杆菌ATCC23355 |
贮存
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。
参考文献
1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
2、KILIAN, M. a. BLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
大肠杆菌显色培养基的微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。
注:回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。
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