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念珠菌显色培养基根据酶底物法,通过显色来区别不同念珠菌,30-35℃培养24-72小时后,白色念珠菌显绿色,热带念珠菌显蓝灰色,光滑念珠菌显淡紫色至紫色,克柔假丝酵母菌显紫粉色,其它念珠菌显白色,细菌被抑制。
成份(g/L)
胨 | 10.2 |
氢罂素 | 0.2 |
色素 | 22.0 |
琼脂 | 15.0 |
pH 6.3±0.2 25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得z佳的结果。
检验原理
蛋白胨提供碳氮源;琼脂是培养基的凝固剂;抑制剂抑制杂菌的生长;色素对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团
用法
称取本品 9.7g(可按 4.85g/100ml 的比例扩大或缩小),加入 200ml 蒸馏水或纯化水中,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。将加热后的培养基水浴冷却至 45-50℃,轻轻地摇匀,倾入无菌平皿(9cm 的 15ml/皿,7cm 的 10ml/皿),琼脂*凝固后,备用。
操作步骤
1、按中国药典方法制备样品液;
2、取样品液接种至适宜的培养基上培养;
3、将疑似菌落接种至念珠菌显色培养基平板上,30-35℃培养 24-72 小时。白色念珠菌典型特征为绿色,热带念珠菌显蓝灰色,光滑念珠菌显淡紫色至紫色,克柔假丝酵母菌显紫粉色,其它念珠菌显白色,细菌被抑制。
4、对可疑白色念珠菌菌落应进一步进行适宜的鉴定试验。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈淡黄色透明固态。
2、微生物试验
在 30-35℃ 培养 24-72 小时:
质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 |
白色念珠菌 | CMCC(F)98001 | +++ | 绿色 |
热带念珠菌 | ATCC13803 | +++ | 蓝灰色 |
克柔假丝酵母菌 | ATCC14243 | +++ | 紫粉色 |
光滑念珠菌 | ATCC15126 | +++ | 淡紫色-紫色 |
其它念珠菌 | / | +++ | 白色 |
大肠埃希氏菌 | CMCC(B)44102 | - | 抑制 |
方法的局限性
本培养基鉴定白色念珠菌,少数情况下可能会出现假阳性或假阴性,需做其它补充试验。
典型特征
白色念珠菌典型特征为绿色,热带念珠菌显蓝灰色,光滑念珠菌显淡紫色至紫色,克柔假丝酵母菌显紫粉色,其它念珠菌显白色,细菌被抑制。
贮存
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干粉培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。
念珠菌显色培养基(1000ml)微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置25-30℃需氧培养48-72小时。
注:回收率计算时,用SDA琼脂做对照培养基。
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